Animal Tissue Direct PGR rinkinio (be mėginių ėmimo įrankių) protokolas
Komplekto aprašymas:
Tiesiogiai naudokite gyvūnų audinių lizatą kaip šabloną PGR amplifikacijai, be atskiro DNR ekstrahavimo, greitas ir didelis jautrumas.
◮Nereikia daug laiko reikalaujančio ir brangaus DNR valymo.
◮Mėginio paklausa nedidelė, paimkite tik vieną sėklą.
◮Nereikia jokių specialių apdorojimo priemonių, tokių kaip šlifavimas ir smulkinimas, o operacija paprasta.
◮Optimizuota PGR sistema leidžia PGR turėti didesnį specifiškumą ir stipresnę toleranciją PGR reakcijos inhibitoriams.
Aprašymai
Šiame rinkinyje naudojama unikali lizės buferio sistema, leidžianti greitai išlaisvinti genominę DNR iš gyvūnų audinių mėginių PGR reakcijoms, todėl jis ypač tinkamas didelio masto genetiniams tyrimams.
Genominės DNR atpalaidavimo iš lizės buferio procesas baigiamas per 10-30 minučių 65 °C temperatūroje.Jokių kitų procesų, tokių kaip baltymų ir RNR pašalinimas, nereikia, o išleista DNR pėdsakų gali būti naudojama kaip PGR reakcijos šablonas.
2 × PGR lengvaTMMišinys gerai toleruoja PGR reakcijos inhibitorius ir gali naudoti bandinio lizatą, kurį reikia tirti, kaip šabloną efektyviam ir specifiniam amplifikavimui.Šio reagento sudėtyje yra Foregene D-Taq DNA polimerazės, dNTP, MgCl2, reakcijos buferis, PGR optimizatorius ir stabilizatorius.
D-Taq DNR polimerazė yra DNR polimerazė, specialiai sukurta Foregene tiesioginėms PGR reakcijoms.D-Taq DNR polimerazė stipriai toleruoja įvairius PGR reakcijos inhibitorius ir gali efektyviai amplifikuoti nedidelius DNR kiekius įvairiose sudėtingose reakcijos sistemose, o amplifikacijos greitis gali siekti 2Kb/min, o tai ypač tinka tiesioginei PGR reakcijai.
Specifikacijos
50 × 20 µl rxns, 200 × 20 µl rxns, 500 × 20 µl rxns, 2000 × 20 µl rxns
Komplekto komponentai
| I dalis | Buferis AL |
| Foregene proteazė | |
| 6 × DNR įkėlimo buferis | |
| II dalis | 2 × PGR lengvaTMSumaišykite |
Savybės ir privalumai
■Jokio daug laiko reikalaujančio ir brangaus DNR valymo
■ Mėginių poreikis nedidelis, galima ištirti tik 5 mg gyvūnų audinių.
■ Nereikia jokio specialaus apdorojimo, pvz., šlifavimo ir smulkinimo, o operacija paprasta.
■ Dėl optimizuotos PGR sistemos PGR yra specifiškesnis ir atsparesnis PGR reakcijos inhibitoriams.
Komplekto parametrai
Naudojimas: įvairūs gyvūnų audiniai.
DNR, išsiskirianti po mėginio lizės: naudojama tik kaip PGR šablonas.
Rinkinys gali būti naudojamas šiems tikslams: transgenozės identifikavimui, gyvūnų genotipų nustatymui ir kt.
Darbo eiga
Sandėliavimas ir galiojimo laikas
Šio rinkinio I dalis turėtų būti laikoma 2–8 val℃.
Reagentas Buffer AL gali būti laikomas 12 mėnesių sausomis sąlygomis;jį galima laikyti 2-8℃ilgesniam laikymui.
Reagentas Foregene Protease turi unikalią formulę.Norėdami užtikrinti jo aktyvumą ir stabilumą, laikykite jį 4℃12 mėnesių.
6 reagentas×DNR įkėlimo buferis gali būti laikomas 4℃arba -20℃ilgam laikui.
Šio rinkinio II dalis turėtų būti laikoma -20 temperatūroje℃.
2 reagentas×Lengvas PGRTMMišinį galima laikyti 12 mėnesių -20 temperatūroje℃;jei jis naudojamas dažnai, jis taip pat gali būti laikomas 4℃trumpalaikiam saugojimui (sunaudoti per 10 dienų).
