• Facebook
  • linkedin
  • youtube

W:Brother, atvirkštinė transkripcija baigta ir galiausiai paskutinis žingsnis – fluorescencinė kiekybinė PGR!Ei, broli, kas yra realaus laiko kiekybinė PGR?
M: PCR jūs visada žinote, tiesa?
W: Žinote, PGR yra polimerazės grandininė reakcija, ir tai technologija, kuri padidina DNR!
M: Tai beveik… Tai techninis metodas, skirtas tikslinei sekai sustiprinti daugiau nei milijoną kartų naudojant specifinius pradmenis, bet tai tik rodo tikslinės sekos buvimą ar nebuvimą ir negali nustatyti pradinio šablono kiekio.Fluorescencinė kiekybinė PGR yra techninis metodas, sukurtas šiai problemai išspręsti.Realaus laiko PGR ir kiekio PGR (qPCR) paprastai nurodo tai.
W: Skirtumas nuo įprastos PGR yra fluorescencijos kiekybinis nustatymas?
M: Taip, tai yra, kiekvieno PGR ciklo išplėtimo etape aptinkamas fluorescencinio signalo intensyvumas, o pradinis šablono kiekis gali būti apskaičiuojamas pagal signalo intensyvumo pokytį.
W: Tai atrodo taip sudėtinga!Ar turiu tai skaičiuoti pačiam?
M: Tam reikia mokytis lėtai, geriausia suprasti principą.Dabar pirmiausia galite sutelkti dėmesį į CT reikšmę, kuri yra gana intuityvūs eksperimentiniai duomenys, o jos dydis atitinka pradinio šablono dydžio dydį.Taip pat yra grafikų, tokių kaip stiprinimo kreivės ir lydymosi kreivės.Jie turi galutinį žodį, ar jūsų eksperimentas sėkmingas, ar ne.
V: O, broli.Tada aš atliksiu qPCR eksperimentą!
M: Ypatingą dėmesį skirkite ir nedėkite šablonų į reagento sritį, kitaip jūsų nepanaudotas mišinys bus lengvai užterštas!
W: Supratau!

1

Realaus laiko PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I rinkinys

Didesnis efektyvumas, didesnis specifiškumas
Didelis jautrumas, geras suderinamumas

2 3


Paskelbimo laikas: 2022-07-22