1: Laiku pakeiskite eksperimentines medžiagas

Nustatykite (NTC) neigiamą kontrolę ir pakartokite tai daug kartų.Nustačius, kad laboratorijoje yra PGR produkto užterštumas, laiku pakeiskite visas eksperimentines medžiagas.Tokie kaip: iš naujo praskiesti ir paruošti pradmenis, pakartotinai sterilizuoti pipetės antgalį, EP tūbelę, ddH2O ir kt., pakeisti nauja pipete ir laikinai pasiskolinti kitas laboratorijas PGR eksperimentams atlikti.Prieš pradedant eksperimentą, užteršta laboratorija turi būti vėdinama ir apšvitinama ultravioletiniais spinduliais, kol bus pašalintas PGR produkto užterštumas.

2: pailginkite UV poveikio laiką

Verta paminėti, kad norint pašalinti DNR užterštumą, įprastas ultravioletinis spinduliavimas turėtų būti pratęstas 2 valandomis nei įprastai.Nepaisant to, UV spinduliuotės poveikis mažiems DNR užteršimo fragmentams (mažesniems nei 200 bp) pašalinimui vis dar nėra geras.

Ultravioletinės bangos ilgis (nm) paprastai yra 254/300 nm, o apšvitinti pakanka 30 minučių.Reikėtų pažymėti, kad renkantis UV, kad būtų pašalintas likusių PGR produktų užterštumas, reikia atsižvelgti į PGR produkto ilgį ir bazių pasiskirstymą produktų sekoje.UV spinduliavimas veiksmingas tik ilgiems fragmentams, viršijantiems 500 bp, ir mažai veikia trumpus fragmentus.

Švitinant UV spinduliais, pirimidino bazės PGR produkte sudarys dimerus.Šie dimerai gali nutraukti pratęsimą, tačiau ne visi pirimidinai DNR grandinėje gali sudaryti dimerus, o UV spinduliuotė taip pat gali sulaužyti dimerus..Dimero susidarymo laipsnis priklauso nuo UV bangos ilgio, pirimidino dimero tipo ir nukleotidų sekos greta dimero vietos.Todėl, jei PGR amplifikuoti fragmentai yra maži, rekomenduojama naudoti UNG anti-PGR produktų užteršimo sistemą.

3: dažniausiai naudojami DNR taršos valikliai

Įpylus pipetes lengvai susidaro aerozoliai, ko sunku išvengti, ir jie greitai nusės.Todėl neabejotinai yra geras pasirinkimas dažnai naudoti specialius DNR taršos šaliklius, kad būtų išvengta DNR taršos plitimo.

4: naudokite UNG apsaugos nuo taršos sistemą

Pašalinus PGR produkto užteršimą, bandymų laboratorija gali naudoti UNG anti-PGR produkto užteršimo sistemą, kad išvengtų PGR produkto užteršimo.Bendrosiose laboratorijose galite atlikti paprastas eksperimentines pertvaras, griežtai atskirti PGR produkto sritį nuo kitų sričių, nustatyti tam tikras laboratorijų taisykles ir reglamentus bei atlikti atitinkamus mokymus, kad išvengtumėte PGR produkto užteršimo.

Rekomendacijos: Pagrįstos PGR laboratorijos sukūrimas, geros PGR aplinkos palaikymas, standartinių PGR veikimo procedūrų suformulavimas ir kruopštaus eksperimentuotojų veiklos supratimo ugdymas yra raktas į PGR eksperimentų taršos prevenciją arba sumažinimą.