SOP sistemos kūrimas

Sukurkite PGR eksperimento SOP, kad standartizuotų eksperimento personalo elgesį.

Eksperimentuotojai griežtai laikosi darbo procedūrų ir iki minimumo sumažina PGR taršą, kurią gali sukelti žmogiškieji veiksniai, arba užkerta kelią taršos atsiradimui operacijos metu.Be to, eksperimento vykdytojas turėtų turėti atitinkamų profesinių žinių ir įgūdžių, įskaitant įgūdžius valdyti susijusią įrangą, išaiškinti visą darbo procesą, įsisavinti taršos gydymo metodus ir laboratorinės kokybės kontrolės metodus, mokėti teisingai interpretuoti tyrimų rezultatus.

Pastato standartinė PGR laboratorija

PGR laboratorija iš esmės suskirstyta į keturias sritis: reagento paruošimo sritį, mėginių apdorojimo sritį, amplifikacijos sritį ir amplifikacijos produkto analizės sritį.Pirmosios dvi sritys yra prieš sustiprinimą, o paskutinės dvi sritys yra po stiprinimo.Prieš amplifikaciją ir po stiprinimo zonas reikia griežtai atskirti.Eksperimentinės medžiagos, reagentai, įrašymo popierius, rašikliai, valymo medžiagos ir kt. gali tekėti tik iš priešamplifikacijos srities į zoną po amplifikacijos, ty iš reagento paruošimo zonos, mėginio apdorojimo zonos, amplifikacijos srities ir amplifikacijos produkto analizės srities, ir neturi tekėti atvirkštine kryptimi.Oro srautas laboratorijoje taip pat turėtų tekėti iš prieš amplifikacijos srities į zoną po amplifikacijos, o ne priešinga kryptimi.

Sumažinkite eksperimentinius veiksmus

Jei laboratorija atlieka tik PGR aptikimą ir identifikavimą, vietoj įprastinės PGR rekomenduojama naudoti fluorescencinę kiekybinę PGR.

Fluorescenciniai kiekybiniai PGR aptikimo rezultatai gali būti renkami ir analizuojami fluorescenciniais signalais, todėl pasibaigus reakcijai nereikia atidaryti dangčio elektroforezei, taip išvengiama PGR produktų užteršimo, atsirandančio dėl reakcijos produktų nutekėjimo, kad susidarytų aerozoliai.Jei padidinsite dangtelių angų skaičių gelio elektroforezės užpildymo metu, tikėtina, kad bus užterštas aerozolis.Rekomenduojama skatinti kiekybinės PGR taikymą ir palaipsniui keisti kokybinę PGR.

Priimti UNG taršos mažinimo sistemą

PGR reakcijai naudojama UNG anti-PGR produktų užteršimo sistema.

Sistema naudoja dUTP, o ne dTTP.Po PGR reakcijos visi PGR produktai (DNR fragmentai) sujungiami su dUTP;kitame PGR reakcijos etape į sistemą pridėtas UNG fermentas inkubuojamas 37 °C temperatūroje 5 minutes prieš PGR, kuris gali būti specifinis. Suardykite visus DNR fragmentus, kuriuose yra dUTP, ir tada atlikite PGR reakciją.Tai gali visiškai pašalinti PGR produktų sukeltą aerozolinį užterštumą.Poveikis parodytas paveikslėlyje žemiau:

Pastaba: Tiesioginei PGR serijai galite pasirinkti FJ Biotech anti-PCR produktų taršos sistemos serijos gaminius.

Pasiūlyti

Laboratorijoms, kurios atlieka didelio masto genotipų nustatymo tyrimus, be pagrįstų laboratorijų kūrimo, primygtinai rekomenduojama naudoti UNG anti-PGR produktų užteršimo sistemą reagentams tirti.

Priminimas: naudojant šią sistemą negalima pašalinti PGR produkto užteršimo, kuris jau buvo sukeltas.Todėl UNG sistema turėtų būti naudojama atitinkamo bandymo pradžioje, o UNG sistema visada turėtų būti naudojama PGR amplifikacijai, kad būtų išvengta PGR produktų užteršimo.Klaidingai teigiamas.

Atliekant didelio masto bandymus, rekomenduojama naudoti Forge Biotech tiesioginę PCR-UNG sistemą, pvz.: Augalų lapų tiesioginis PCR rinkinys-UNG；

Plant Seed Direct PCR rinkinys-UNG；

Gyvūnų audinių tiesioginio PGR rinkinys-UNG；

Mouse Tail Direct PCR rinkinys-UNG；

Zebra Fish Direct PCR rinkinys-UNG.

Šios serijos Foregene rinkiniai gali ne tik greitai ir dideliu mastu atlikti PGR aptikimą, bet ir veiksmingai užkirsti kelią PGR produkto užteršimui ir jį kontroliuoti.