Karštas paleidimo Taq fermentas yra plačiai naudojamas.Palyginti su įprasta DNR polimeraze, karšto paleidimo Taq fermentas gali veiksmingai išvengti tam tikro nespecifinio amplifikacijos ir pradmenų dimerų susidarymo ir gali veiksmingai pagerinti tikslinio geno amplifikacijos sėkmės rodiklį.Ypač genetinių tyrimų srityje karšto paleidimo Taq fermentas buvo nustatytas kaip privalomas standartas pramonėje, todėl įprastos DNR polimerazės naudoti negalima.Kaip matyti iš aukščiau, karšto paleidimo Taq fermentai yra plačiai naudojami.Šiuo metu vidaus rinkoje yra daug karšto paleidimo Taq fermentų markių, tačiau aukštos kokybės karšto paleidimo Taq fermentų nėra daug.Susidūrę su tiek daug karšto paleidimo Taq fermentinių produktų, kaip turėtume pasirinkti?

1. Pasirinkite karšto paleidimo Taq fermentą su dideliu stiprinimo efektyvumu

PGR amplifikacijos efektyvumas yra glaudžiai susijęs su Taq fermento veikimu.Optimizavus gerą Taq fermento reakcijos sistemą, amplifikacijos efektyvumas yra didesnis nei 95%, o pradinio šablono kiekio amplifikacijos diapazonas yra platus.Patenkinama amplifikacija gali būti pasiekta, kai tikslinio geno kiekis yra mažas, ir nėra lengva apsinuodyti, kai šablono kiekis yra didelis, o eksponentinis amplifikacijos laikotarpis yra ilgas.Taq fermento, kurio veikimas prastas, net jei reakcijos sistema buvo optimizuota daug kartų, amplifikacijos efektyvumas vis tiek yra mažesnis nei 90%, amplifikacijos kreivės „S“ forma nėra akivaizdi, nuolydis mažas, o kreivė plokščia.Kai šablono kiekis mažas, jo negalima sustiprinti, o kai šablono kiekis didelis, stiprinimo efektas nėra idealus.Todėl DNR polimerazių, turinčių didelį amplifikacijos efektyvumą, pasirinkimas yra labai svarbus PGR ir qPCR sėkmei.

2. Pasirinkite karšto paleidimo Taq fermentą su stipria fermento galia

Taq fermento fermentinė galia yra susijusi su amplifikacijos efektyvumu.Paprastai kuo stipresnė karšto paleidimo Taq fermento fermentinė galia, tuo ilgesnis eksponentinis PGR amplifikacijos augimo periodas, tuo tipiškesnė „S“ formos kreivė, tuo didesnė fluorescencinio signalo vertė ir tuo labiau tinka multipleksiniam PGR aptikimui.Firminės DNR polimerazės, turinčios silpną fermentinę galią, paprastai gali palaikyti tik dvipuses reakcijas.Atliekant 3-pleksines reakcijas, stiprinimo kreivė yra žema, fluorescencinio signalo reikšmė maža, o tipinės stiprinimo kreivės nėra, todėl sunku įvertinti rezultatus.

3. Pasirinkite didelio jautrumo karšto paleidimo Taq fermentą

Paprastai kalbant, DNR polimerazė pasižymi dideliu amplifikacijos efektyvumu ir dideliu jautrumu, tačiau yra ir neatitikimų.Jei amplifikuojamo mėginio tikslinio geno gausa yra maža, rekomenduojama ištirti Taq fermento amplifikacijos jautrumą.Dažniausias aptikimo metodas yra 10 arba 5 kartų gradiento praskiedimas tikslinio geno plazmidės fragmentui, PGR aptikimas mažesniu praskiedimu ir didesnio aptikimo jautrumo karšto paleidimo Taq fermento pasirinkimas.

Iš to, kas išdėstyta aukščiau, matyti, kad mokslininkai turi rinktis pagal savo eksperimentinius reikalavimus ir finansavimo sąlygas.Geriausia atlikti gradiento praskiedimo amplifikacijos eksperimentą, kad būtų galima nustatyti karšto paleidimo Taq fermento amplifikacijos efektyvumą ir jautrumą.

Foregeno pavyzdys“s Taq DNR polimerazė:

Foreasy HS Taq DNR polimerazė

apibūdinimas

Foreasy HS Taq DNR polimerazė yra DNR polimerazė, ekspresuojama Escherichia coli inžinerinėse bakterijose genų rekombinacijos technologija.Fermentas yra derinamas su unikaliu reakcijos buferiu, dėl kurio produktas yra labai atsparus ir suderinamas, o mėginio lizatas (Foregene Lysis sistema) gali būti tiesiogiai naudojamas kaip aptikimo reakcijų šablonas.

Taikymas

Išgrynintų šablonų ir neišgrynintų šablonų kokybinis PGR ir kiekybinis PGR aptikimas.

Kokybės kontrolė

1. Egzogeninės nukleazės aktyvumo neaptikta

2.PGR metodas genominės DNR likučiai be šeimininko aptikti

3. Jis gali efektyviai sustiprinti vienos kopijos genus žmogaus genome

4. Savaitę laikykite kambario temperatūroje, nepastebėjus aktyvumo pokyčių

Išsami informacija apie produktą: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/