Įvadas:

RNR molekulės gali plačiai sąveikauti su kitomis biologinėmis molekulėmis, tokiomis kaip baltymai, DNR ir RNR, todėl ląstelėse ir organizmuose gali egzistuoti makromolekulinių kompleksų pavidalu.Tarp jų RNR-baltymų kompleksai yra RNR egzistavimas ir funkcija Viena iš svarbių formų.RNR ištraukimas yra klasikinis RNR molekulių, ypač sąveikaujančių lncRNR molekulių baltymų, atrankos ir identifikavimo metodas, kurį pripažįsta dauguma mokslininkų ir tarptautinių autoritetingų akademinių žurnalų.Šiandien FORREGENE pasidalins su jumis eksperimentiniu principu ir techniniu RNR ištraukimo procesu, galbūt galėsite jį panaudoti

1. Eksperimentinis RNR ištraukimo technologijos principas:

Biotinu pažymėtų tikslinių lncRNR arba lncRNR fragmentų (įskaitant RNR fragmentus, naudojamus kaip teigiamą ir neigiamą kontrolę) transkripcija ir sintezė in vitro ir inkubavimas su ląstelių ekstraktais;RNR-baltymo arba RNR-RNR kompleksams surinkti naudokite su avidinu pritvirtintus magnetinius rutuliukus. Po kruopštaus plovimo kompleksas išplaunamas.Jei aptinkama baltymo tikslinė molekulė, kuri sąveikauja su lncRNR, atlikite RNR ištraukiamo produkto baltymo elektroforezę, aptikkite tikslinį baltymą dažydami sidabru ir nupjaukite gelį masės spektrometrijai;taip pat tiesiogiai atlikti išskleidžiamojo produkto Western blot patikrinimą;jei aptikta RNR tikslinėms molekulėms, kurios sąveikauja su lncRNR, RNR ištraukiami produktai yra ekstrahuojami RNR ir atliekamas specifinis qRT-PGR aptikimas.

2. RNR ištraukimo technologijos eksperimento procesas:

3. FOREGENE RNR pašalinimo techninė tarnyba:

Ląstelių kultūros

Ląstelių bendro/branduolinio/plazmos baltymų ekstrakto paruošimas

RNR nuleidimo eksperimentas

SDS-PAGE elektroforezė, sidabro beicavimas

Masių spektrometrijos ir WB eksperimentai

Eksperimentinė ataskaita

4. Eksperimentinis atvejis

Toliau pateiktame paveikslėlyje parodyti FJ Bio-Bio RNR nuleidimo ir SDS-PAGE elektroforezės aptikimo rezultatai, kuriuose raudona rodyklė žymi skirtumo juostą:

Sičuano universiteto profesoriaus Song Xu tyrimų grupė sukaupė 15 metų ilgalaikio kaupimo lncRNR tyrimų srityje.„Foregene Bio“ ir profesoriaus Song Xu tyrimų grupė bendradarbiavo siekdama paleisti lncRNR RNR ištraukimo technologiją, kuri suteiks jums patenkinamus jūsų eksperimento rezultatus.