PGR metodai ir užterštumas nukleorūgščių aerozoliu nukleino rūgščių tyrimų laboratorijose yra tarsi dvi monetos pusės.Galime tik pasirinkti, turėti ar ne, bet negalime pasirinkti, ar norime, ar išleisime.

1. DNR šalinimo priemonės atranka

Norint pasiekti erdvinį nukleorūgščių aerozolio užterštumo pašalinimą, pirmiausia reikia atrinkti DNR šaliklius, galinčius pašalinti nukleino rūgštis skystoje būsenoje.Nes nėra daug DNR šalinimo priemonių, kurios tikrai veikia.Dėl eksperimentinio metodo skaitykite: DNR šalinimo priemonė negali būti „slaptas laboratorijos kampelis“!

Šiame eksperimente 100 kopijų / μL (CT maždaug 31) ASFV plazmidės ir DNR šalinimo priemonės, kiekybiškai įvertintos skaitmeniniu PGR, buvo sumaišytos vienodais tūriais, o po to atitinkamai 10 min., 20 min. ir 30 min. reagavo kambario temperatūroje.Po nukleino rūgšties ekstrahavimo buvo atlikta qPCR amplifikacija.Buvo lyginama teigiama kontrolė, sumaišyta su plazmide ir vandeniu.Kadangi eksperimentas nebuvo baigtas vienu metu, gali būti tam tikras nuokrypis tarp rezultatų, tačiau tai neturi įtakos eksperimento išvadoms.Iki šiol įvertinau 10 komercinių DNR šalinimo produktų.Tik Nr. 1, Nr. 6 ir Nr. 8 produktai gali veiksmingai skaidyti plazmidės DNR skystoje būsenoje.Kiti produktai beveik neturi jokio poveikio.

1 lentelė Komercinio DNR šalinimo priemonės nukleino rūgščių šalinimo poveikis

2. Dažniausiai naudojamų dezinfekantų DNR pašalinimo efekto eksperimentas

1. Dažniausiai naudojamų dezinfekavimo priemonių patikra

Laboratorijose dažniausiai naudojamos įvairios dezinfekavimo priemonės: aldehidai, fenoliai, alkoholiai, ketvirtinės amonio druskos, peroksidai, chloro preparatai, rūgštys ir bazės.Šių dezinfekcinių priemonių dezinfekcinis poveikis mikroorganizmams buvo visiškai patikrintas eksperimentais, tačiau nėra pakankamai eksperimentinių duomenų apie nukleorūgščių skaidymo poveikį.Nukleino rūgščių tyrimų laboratorijoms reikia dezinfekcinės priemonės, kuri ne tik gerai dezinfekuotų mikroorganizmus, bet ir galėtų suardyti DNR.Tyrimo rezultatai rodo, kad reikalavimus atitinka tik du chloro preparatai – 84 dezinfekantas ir trichlorizocianuro rūgštis bei 1 M druskos rūgštis.Kadangi 1 M druskos rūgštis yra labai ėsdinanti, chloro preparatus rekomenduojama naudoti kaip atliekas nukleorūgščių tyrimų laboratorijose.Tačiau chloro preparatai ėsdina metalus ir negali būti naudojami instrumentams ir įrangai dezinfekuoti.

2 lentelė Įvairių tipų dezinfekavimo priemonių DNR pašalinimo poveikis

2. Mažiausia efektyvi chloro preparatų koncentracija

Chloro pagrindu pagamintos dezinfekcijos priemonės turi stiprų DNR skaidymo poveikį, tačiau dėl metalo ėsdinimo ir dirginimo jais galima valyti grindis, nemetalinius stalviršius, mirkymo antgalius, centrifugos mėgintuvėlius ir kitus tyrimo elementus.

Pagal „Naująsias koronarinės pneumonijos epidemijos dezinfekcijos technines gaires“: Teršalai (pacientų kraujas, išskyros ir vėmalai) turimas chloras 5g/L-10g/L chloro turintis dezinfekantas;grindims, sienoms ir objektų paviršiams naudojamas turimas chloras 1g/l Chloro dezinfekavimo priemonė: drabužiai, patalynė ir kita tekstilė iš pradžių 30 minučių mirkomi chloro dezinfekavimo priemone su 0,5g/l turimu chloru, o tada valomi įprastai.

3 lentelė skirtingų koncentracijų chloro dezinfekavimo priemonės DNR pašalinimo poveikis

Bandymo rezultatai rodo, kad: kai efektyvi chloro koncentracija yra didesnė arba lygi 1,2 g/l, chloro turintis dezinfekantas gali visiškai suardyti 100 kopijų/μL plazmidės, kai ji naudojama 5 minutes.Veikiant 10 minučių, 84 dezinfekavimo priemonė, kurios efektyvioji chloro koncentracija yra didesnė nei 0,6 g/l, gali visiškai suardyti 100 kopijų/μL plazmidžių.

3. Nukleorūgščių aerozoliu užteršto oro pašalinimo eksperimentas

Kaip išvalyti nukleorūgščių aerozoliais užterštą orą?Dauguma minčių yra sukurti aerozoliais užterštą aplinką ir tada ją išvalyti arba išvalyti nukleino rūgštis po užteršimo.Man beprasmis eksperimentas, kurio negalima kartoti ir eksperimento rezultatai negali būti kiekybiškai išanalizuoti, todėl pasiskolinau kai kuriuos dezinfekcinės oro dezinfekcijos būdus.Žr. „GB27948-2020 Bendrieji oro dezinfekavimo priemonių reikalavimai“ ir „Techninės dezinfekcijos specifikacijos“

1. Bandymo medžiagos

1.1 DNR šalinimo priemonė: Šiame eksperimente buvo atrinkti du komerciniai DNR šalikliai 6 ir 8 1 lentelėje.

1.2 Bandomoji plazmidė: Atsižvelgiant į tai, kad daugumos laboratorinės taršos KT vertė bus didesnė nei 30, šiuo metu panaudota ASFV geno plazmidės koncentracija yra apie 100 kopijų/μL, o fluorescencinė kiekybinė PGR CT yra apie 31,07.Įdėkite plazmidę į flokuojančią vatos tamponą ir išdžiovinkite ore.

1.3 Bandymo priemonė: Bilingkehan KVBOX dezinfekavimo priemonė, kurią maloniai palaiko Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., puikiai dezinfekuoja orą naudojant vandenilio peroksido dezinfekavimo priemonę ir gali veiksmingai naikinti sporas ir kitus mikroorganizmus.

1.4 Bandymo vieta: uždaras maždaug 0,1 kubinio metro perdavimo langas.

2. Bandymo metodas

Dezinfekavimo aparate nustatytas dezinfekcinės priemonės kiekis yra 10 ml, o koncentracija 100 ml/m3, o tai daug didesnė nei „GB27948-2020 bendrieji oro dezinfekavimo priemonių reikalavimai“: naudojant aerozolinę purškiamą dezinfekciją, dezinfekavimo priemonės kiekis turi būti ≤10 ml/m3.