„Zebra Fish“ tiesioginis PCR rinkinys-UNG tiesioginis PCR lizės reagentas (zebrafish)
Aprašymai
Šiame rinkinyje naudojama unikali lizės buferio sistema, skirta greitai išlaisvinti genominę DNR iš zebrafish ir kitų gėlavandenių žuvų audinių, uodegos pelekų ar žuvų ikrų mėginių PGR reakcijoms, todėl jis ypač tinkamas didelio masto genetiniams tyrimams.Genominės DNR atpalaidavimo iš lizės buferio procesas baigiamas per 10-30 minučių 65 °C temperatūroje.Jokių kitų procesų, tokių kaip baltymų ir RNR pašalinimas, nereikia, o išleista DNR pėdsakų gali būti naudojama kaip PGR reakcijos šablonas.
2× PCR EasyTM Mix (UNG) naudoja dUTP, o ne dTTP, remiantis 2× PCR EasyTM Mix, ir prideda UNG fermentą (Uracil-N-glikozilazę), kuris tuo pačiu metu gali suardyti šabloną, kuriame yra dUTP.Prieš PGR reakciją UNG fermentas naudojamas PGR produktui, kuriame yra uracilo, skaidyti.UNG fermentas neturės jokio poveikio šablonui, kuriame nėra uracilo, taip užtikrinant amplifikacijos specifiškumą ir tikslumą bei užkertant kelią didelio masto genetinių tyrimų galimybei.Įvyko PGR produktų užteršimas.
D-Taq DNR polimerazė yra DNR polimerazė, specialiai sukurta Foregene tiesioginėms PGR reakcijoms.D-Taq DNR polimerazė stipriai toleruoja įvairius PGR reakcijos inhibitorius ir gali efektyviai amplifikuoti nedidelius DNR kiekius įvairiose sudėtingose reakcijos sistemose, o amplifikacijos greitis gali siekti 2Kb/min, o tai ypač tinka tiesioginei PGR reakcijai.
Specifikacijos
50 × 20 µl rxns, 200 × 20 µl rxns, 500 × 20 µl rxns, 2000 × 20 µl rxns
Komplekto komponentai
I dalis | Buferis FP |
Foregene proteazė | |
6 × DNR įkėlimo buferis | |
II dalis | 2 × PCR lengvasTMMišinys (UNG) |
Instrukcijos |
Savybės ir privalumai
■ Nereikia daug laiko ir brangaus DNR valymo.
■ Mėginių poreikis nedidelis, galima ištirti tik 1 mg žuvies uodegos pelekų arba 10 žuvų ikrų.
■ Nereikia jokių specialių apdorojimo priemonių, tokių kaip šlifavimas ir smulkinimas, o operacija paprasta.
■ Anti-pollution PGR sistema 2× PCR EasyTM Mix (UNG), kuri gali efektyviai pašalinti PGR produktų sukeliamą taršą ir užtikrinti amplifikacijos specifiškumą bei tikslumą.
■ Dėl optimizuotos PGR sistemos PGR yra specifiškesnis ir atsparesnis PGR reakcijos inhibitoriams.
Komplekto parametrai
Naudojimas: Zebra žuvis ir kitos gėlavandenės žuvys.
DNR, išsiskirianti po mėginio lizės: naudojama tik kaip PGR šablonas.
Rinkinys gali būti naudojamas šiems tikslams: transgenozės identifikavimui, gyvūnų genotipų nustatymui ir kt.
Darbo eiga
Sandėliavimas ir galiojimo laikas
Šio rinkinio I dalis turėtų būti laikoma 2–8 ℃ temperatūroje.
Reagentas Buffer FP gali būti laikomas 12 mėnesių sausomis sąlygomis;jį galima laikyti 2-8 ℃ temperatūroje ilgiau.
v Reagentas Foregene Protease turi unikalią formulę.Norėdami užtikrinti jo aktyvumą ir stabilumą, 12 mėnesių laikykite 4 ℃ temperatūroje.
vReagent 6×DNA Loading Buffer gali būti laikomas 4 ℃ arba -20 ℃ temperatūroje ilgą laiką.
Šio rinkinio II dalis turi būti laikoma -20 ℃ temperatūroje.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), jei naudojamas dažnai, jis taip pat gali būti laikomas 4 ℃ temperatūroje trumpam laikymui (sunaudoti per 10 dienų).