• Facebook
  • linkedin
  • youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq DNR polimerazė

„Foreasy HS Taq“ DNR polimerazės vaizdas
  • Foreasy HS Taq DNR polimerazė

Komplekto aprašymas:

◮Didelis specifiškumas: fermentas, pasižymintis dideliu karšto paleidimo aktyvumu.

◮Greitas stiprinimas: 10 sek./kb.

◮Didelis šablono pritaikymas: gali būti naudojamas efektyviai sustiprinti aukštąGCvertėirįvairūs sunkiai amplifikuojami DNR šablonai.

◮Stipri ištikimybė: ištikimybė yra 6 kartusof paprastas Taq fermentas.

svetima jėga


Produkto detalė

Produkto etiketės

DUK

apibūdinimas

Foreasy HS Taq DNR polimerazė yra naujas Taq fermentas, ekspresuojamas Escherichia coli inžinerinėse bakterijose genų rekombinacijos technologija.Apdorojus fermentą specialiu procesu, jis's aktyvumas yra slopinamas prieš terminį aktyvavimą, taip slopinant nespecifinį amplifikaciją, kurią sukelia nespecifinis pradmenų arba pradmenų dimerų atkaitinimas žemos temperatūros sąlygomis.Šis produktas tinka labai specifinei PCR Reactjonų, M daugkartinis PGR , didelis GC kiekis (> 60 %),suantrinė struktūraArba kitasstiprus foninis genomasicsamplifikacija ir didelio masto genomasicsamplifikacijos aptikimas.Fermentas turi 5' → 3' DNR polimerazės aktyvumą ir 5' → 3' egzonukleazės aktyvumą, bet neturi 3' → 5' egzonukleazės aktyvumo.

Komplekto komponentai

Komponentas IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNR polimerazė (5 U/μL)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2 × Taq reakcijos buferis  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Savybės ir privalumai

- Didelis specifiškumas: fermentas, pasižymintis dideliu karšto paleidimo aktyvumu.

- Greitas stiprinimas: 10 sek./kb.

- Didelis šablono pritaikymas: gali būti naudojamas efektyviai sustiprinti aukštąGCvertėirįvairūs sunkiai amplifikuojami DNR šablonai.

- Stipri ištikimybė: ištikimybė yra 6 kartusof paprastas Taq fermentas.

Komplekto taikymas

- Įvairios PGR/qPCR sistemos ir tiesioginės PGR sistemos

- PGR amplifikuotas DNR fragmentas

- DNR ženklas

- DNR sekos nustatymas

- PGR plius A uodega

Veiklos apibrėžimas

1U : fermento kiekis, reikalingas 10 nmolDNRį rūgštyje netirpią medžiagą, naudojant aktyvuotą lašišos spermos DNR kaip šabloną / pradmenį, 74 °C, 30 min.

Reakcijos būsena

Temperatūra Reakcijos laikas Pasivažinėjimo dviračiu laikas
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sek  40
60°C 10 sek

Pastaba:Į 10 µL ir 20 µL sistemas įpilkite vienodo tūrio mineralinės alyvos, jei termocikleris neturi kaitinimo dangčio.

PGR reakcijos sąlygos skiriasi priklausomai nuo šablonų, pradmenų ir panašių struktūrinių sąlygų.Atliekant konkrečią operaciją, būtina sukurti optimalias reakcijos sąlygas, įskaitant atkaitinimo temperatūrą, pratęsimo laiką ir kt., atsižvelgiant į konkrečias sąlygas, tokias kaip šablono tipas, tikslinio fragmento dydis, amplifikuoto fragmento bazinė seka ir GC kiekis bei pradmens ilgis.

Sandėliavimas

-20 ± 5 °C 2 metus arba -80 °C ilgalaikiam saugojimui.

  • Ankstesnis:
  • Kitas:

    • Nėra stiprinimo signalų

    1. Rinkinyje esanti Taq DNR polimerazė praranda savo aktyvumą dėl netinkamo rinkinio laikymo arba pasibaigus jo galiojimo laikui.
    Rekomendacija: Patvirtinkite rinkinio laikymo sąlygas;iš naujo įdėkite atitinkamą Taq DNR polimerazės kiekį į PGR sistemą arba įsigykite naują realaus laiko PGR rinkinį susijusiems eksperimentams.

    2.DNR šablone yra daug Taq DNR polimerazės inhibitorių.
    Pasiūlymas: iš naujo išvalykite šabloną arba sumažinkite naudojamo šablono kiekį.

    3. Mg2+ koncentracija netinka.
    Rekomendacija: mūsų teikiamo 2× Real PCR mišinio Mg2+ koncentracija yra 3,5 mM.Tačiau kai kurių specialių pradmenų ir šablonų Mg2+ koncentracija gali būti didesnė.Todėl galite tiesiogiai pridėti MgCl2, kad optimizuotumėte Mg2+ koncentraciją.Norint optimizuoti, rekomenduojama kiekvieną kartą padidinti Mg2+ 0,5 mM.

    4. PGR amplifikacijos sąlygos netinkamos, o pradmenų seka arba koncentracija yra netinkama.
    Pasiūlymas: patvirtinkite pradmenų sekos teisingumą ir gruntas nebuvo sugadintas;jei stiprinimo signalas nėra geras, pabandykite sumažinti atkaitinimo temperatūrą ir atitinkamai sureguliuokite pradmenų koncentraciją.

    5. Šablono kiekis yra per mažas arba per daug.
    Rekomendacija: Atlikite šablono linearizacijos gradiento praskiedimą ir pasirinkite šablono koncentraciją su geriausiu PGR efektu realiojo laiko PGR eksperimentui.

    NTC fluorescencinė vertė per didelė

    1. Reagento užterštumas, atsiradęs eksploatacijos metu.
    Rekomendacija: Realaus laiko PGR eksperimentams pakeiskite naujais reagentais.

    2. Užteršimas įvyko ruošiant PGR reakcijos sistemą.
    Rekomendacija: Eksploatacijos metu imkitės būtinų apsaugos priemonių, tokių kaip: mūvėkite latekso pirštines, naudokite pipetės antgalį su filtru ir pan.

    3. Pradmenys suskaidomi, o pradmenų skilimas sukels nespecifinę amplifikaciją.
    Patarimas: naudokite SDS-PAGE elektroforezę, kad nustatytumėte, ar pradmenys yra suskaidyti, ir pakeiskite juos naujais pradmenimis, kad atliktumėte realaus laiko PGR eksperimentus.

    Pradmenų dimeris arba nespecifinė amplifikacija

    1. Mg2+ koncentracija netinka.
    Rekomendacija: mūsų teikiamo 2× Real PCR EasyTM Mix Mg2+ koncentracija yra 3,5 mM.Tačiau kai kurių specialių pradmenų ir šablonų Mg2+ koncentracija gali būti didesnė.Todėl galite tiesiogiai pridėti MgCl2, kad optimizuotumėte Mg2+ koncentraciją.Norint optimizuoti, rekomenduojama kiekvieną kartą padidinti Mg2+ 0,5 mM.

    2. PGR atkaitinimo temperatūra per žema.
    Patarimas: kiekvieną kartą padidinkite PGR atkaitinimo temperatūrą 1 ℃ arba 2 ℃.

    3. PGR produktas per ilgas.
    Rekomendacija: Realaus laiko PGR produkto ilgis turi būti nuo 100 iki 150 bp, ne daugiau kaip 500 bp.

    4. Pradmenys suskaidomi, o pradmenų skilimas lems specifinio amplifikacijos atsiradimą.
    Patarimas: naudokite SDS-PAGE elektroforezę, kad nustatytumėte, ar pradmenys yra suskaidyti, ir pakeiskite juos naujais pradmenimis, kad atliktumėte realaus laiko PGR eksperimentus.

    5. PGR sistema netinkama arba sistema per maža.
    Patarimas: PGR reakcijos sistema per maža, todėl aptikimo tikslumas sumažės.Norint pakartotinai atlikti realiojo laiko PGR eksperimentą, geriausia naudoti reakcijos sistemą, kurią rekomenduoja kiekybinis PGR instrumentas.

    Prastas kiekybinių verčių pakartojamumas

    1. Prietaisas veikia netinkamai.
    Patarimas: tarp kiekvienos instrumento PGR skylės gali būti klaidų, todėl temperatūros valdymo arba aptikimo metu atkuriamumas prastas.Patikrinkite pagal atitinkamo prietaiso instrukcijas.

    2. Mėginio grynumas nėra geras.
    Rekomendacija: nešvarūs mėginiai blogai atkuria eksperimentą, įskaitant šablono ir pradmenų grynumą.Geriausia iš naujo išgryninti šabloną, o pradmenis geriausia išvalyti naudojant SDS-PAGE.

    3. PGR sistemos paruošimo ir saugojimo laikas per ilgas.
    Patarimas: naudokite realiojo laiko PGR sistemą PGR eksperimentui iš karto po paruošimo ir nepalikite jos per ilgai.

    4. PGR amplifikacijos sąlygos netinkamos, o pradmenų seka arba koncentracija yra netinkama.
    Pasiūlymas: patvirtinkite pradmenų sekos teisingumą ir gruntas nebuvo sugadintas;jei stiprinimo signalas nėra geras, pabandykite sumažinti atkaitinimo temperatūrą ir atitinkamai sureguliuokite pradmenų koncentraciją.

    5. PGR sistema netinkama arba sistema per maža.
    Patarimas: PGR reakcijos sistema per maža, todėl aptikimo tikslumas sumažės.Norint pakartotinai atlikti realiojo laiko PGR eksperimentą, geriausia naudoti reakcijos sistemą, kurią rekomenduoja kiekybinis PGR instrumentas.

    Parašykite savo žinutę čia ir atsiųskite mums

    SusijęsProduktai

    Paspauskite Enter, kad ieškotumėte, arba ESC, kad uždarytumėte