QuickEasyᵀᴹ Realiojo laiko PCR rinkinys-Taqman
Aprašymai
2× QuickEasyTMTikrasis PCR Mix-Taqman, kurį teikia QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman rinkinys yra naujos kartos pagrindinio mišinio sistema, skirta realaus laiko PGR amplifikacijos reakcijai naudojant specifinius fluorescencinius zondus.Jo pagrindinė Foregene HS Taq DNR polimerazė yra pagrįsta antikūnų modifikavimu, naudojama kartu su Foregene toliau optimizuota PGR sistema, pasižymi didesniu specifiškumu ir amplifikacijos efektyvumu.Palyginti su įprastu PGR mišiniu, jis turi stipresnę amplifikavimo galimybę ir mažesnį neatitikimo dažnį.Jis gali būti naudojamas fluorescencinėje kiekybinėje PGR reakcijoje, siekiant sumažinti nespecifinį amplifikaciją ir pagerinti PGR tikslumą.Tai gali labai pagerinti produkto specifiškumą ir jautrumą reakcijai.Tuo pačiu metu ROX buvo tiekiamas kaip vidinis etaloninis dažiklis.
„QuickEasy“.TMRealiojo laiko PCR rinkinys-Taqman rinkinys turi plačią taikymo sritį šablono kiekiui ir gali gauti gerą standartinę kreivę skirtinguose kiekybiniuose regionuose, taip pat gali tiksliai nustatyti ir aptikti tikslinius genus su geru pakartojamumu ir dideliu pasitikėjimu.
Specifikacijos
200 pasiruošimų,500 ruošinių,1000 pasiruošimų,2000 Paruošimas
Komplekto komponentai
QuickEasyTMRealaus laiko PCR rinkinys-Taqman(20μlsistema) | ||||
Rinkinio turinys | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 pasiruošimų | 500 pasiruošimų | 1000 pasiruošimų | 2000 Paruošimas | |
2×GreitaiLengvaTM Tikras PCR Sumaišykite-Takmanas | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×ROX etaloninis dažiklis | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
ddH be DNazės2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
IFU | 1gabalas | 1gabalas | 1gabalas | 1gabalas |
Savybės ir privalumai
■ Unikali PGR optimizavimo sistema leidžia 2×QuickEasyTMTikrasis PCR Mix-Taqman labiau suderinamas.
■ Karšto paleidimo Foregene HS Taq polimerazė turi didesnį stiprinimo efektyvumą, didesnį stiprinimo jautrumą ir didesnį stiprinimo specifiškumą.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman naudoja unikalią Foregene optimizuotą sistemą, kad pagerintų sekos specifinio zondo aptikimo jautrumą ir specifiškumą, kuris gali būti naudojamas genotipui nustatyti ir kopijų skaičiaus variacijai nustatyti bei gauti tikslius rezultatus.
■ Šiame gaminyje yra ROX vidinis etaloninis dažiklis, kuris gali būti naudojamas pašalinti signalo foną ir signalo paklaidą tarp šulinių, o tai klientams patogu naudoti įvairių tipų kiekybiniuose PGR prietaisuose.
Komplekto taikymas
■ Fluorescencinė kiekybinė PGR šablono kiekybinei analizei;
■ Cįprastinė PGR amplifikacija;
■ Gali būti naudojamas alelių aptikimui.
Sandėliavimas ir galiojimo laikas
Rinkinį reikia laikyti -20°C temperatūroje, tamsoje;jei naudojamas dažnai, trumpą laiką galima laikyti ir 4°C temperatūroje (sunaudoti per 10 dienų).
Realaus laiko PGR pradmenų projektavimo principai
Priekinis gruntas ir atvirkštinis gruntas
Realaus laiko PGR atveju pradmenų dizainas yra labai svarbus.Pradmenys yra susiję su PGR amplifikacijos specifiškumu ir efektyvumu ir gali būti sukurti remiantis šiais principais:
Grunto ilgis: 18-30bp.
GC kiekis: 40-60%.
Tm reikšmė: Grunto projektavimo programinė įranga, pvz., Primer 5, gali pateikti grunto Tm vertę.Prieš srovę ir pasroviui esančių pradmenų Tm vertės turi būti kuo artimesnės.Taip pat galima naudoti Tm skaičiavimo formulę: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Atliekant PGR, kaip atkaitinimo temperatūra paprastai pasirenkama žemesnė už pradmenų Tm reikšmę 5 °C temperatūra (atitinkamas atkaitinimo temperatūros padidėjimas gali padidinti PGR reakcijos specifiškumą).
Gruntai ir PGR produktai:
Dizaino pradmenų PGR amplifikacijos produkto ilgis pageidautina 100-150 bp.
Reikėtų kiek įmanoma vengti dizaino gruntų antrinėje struktūrinėje šablono srityje.
Venkite 2 ar daugiau vienas kitą papildančių bazių susidarymo tarp prieš srovę ir pasroviui esančių pradmenų 3′ galų.
Grunto 3′ gnybtų pagrindo negali būti su 3 papildomais iš eilės G arba C.
Patys pradmenys negali turėti papildomų struktūrų, kitaip susiformuos plaukų segtuko struktūra, turinti įtakos PGR amplifikacijai.
ATCG turėtų būti paskirstytas kiek įmanoma tolygiau pradmenų sekoje, o 3′ galinės bazės turėtų būti vengiama kaip T.
1 priedas: „Cell Direct RT-qPCR Kit“ komponentų priedų paketas
1.Ląstelių lizės tirpalas
| |||
Komplekto komponentai (24 šulinėlių lizės sistema / šulinys) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
dalisaš | Buferis CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buferis ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
dalisII | DNR trintukas | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mišinys
| |
Komplekto komponentai (20 μl reakcijos sistema) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × tiesioginis RT mišinys | 800 μl |
DdH be RNazių2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Komplekto komponentai (20 μl reakcijos sistema) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Tiesioginis qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX etaloninis dažiklis | 40 μl | 200 μl |
DdH be RNazių2O | 1,7 ml | 10 ml |