Tiesioginis RT-qPCR rinkinys
Komplekto aprašymas:
◮ Tiesioginis RT-qPCR rinkinys, naudojant Foreasy atvirkštinę transkriptazę ir Foreasy HS Taq DNR polimerazę, sukurtą Foregene, su unikaliu reakcijos buferiu, suteikia šiam rinkiniui didelį atsparumą ir suderinamumą ir gali tiesiogiai išbandyti reakciją naudojant Foregene Lysis sistemą kaip šabloną.Šis rinkinys gali būti taikomas COVID-19 nukleorūgščių aptikimo rinkiniui ir kitų patogeninių bakterijų nukleorūgščių aptikimo rinkinių kūrimui.
apibūdinimas
Tiesioginis RT-qPCR rinkinys suteikia atskirai supakuotą RT-qPCR buferį ir didelio efektyvumo fermentąmišinys (Taq, M-MLV, RI), todėl patogu kurti galinius rinkinius ir sistemąreguliavimas, paprastas patikrinimas.
Specifikacijos
500 t, 50 000 t
Komplekto komponentai
| Rinkinio turinys (20 μL reakcijos sistema) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Tiesioginis fermentų mišinys | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2 × tiesioginis RT-qPCR buferis | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instrukcija | 1 | 1 |
Veikimo žingsniai
Prieš ruošiant reagentą, visi rinkinyje esantys reagentai turi būti atšildyti kambario temperatūroje ir švelniai sumaišyti.
A: Pasiruoškite of šabloną ir reagentas
1. Paruoškite paruoštą RNR šabloną (RNR šablonui išgauti ir išvalyti rekomenduojama naudoti Foregene Total RNA Isolation Kit serijos rinkinį) arba mėginio krekingo produktą (rekomenduojama naudoti Foregene Lysis sistemą), specifinius pradmenis (10 μM) ir kitas susijusias eksploatacines medžiagas, instrumentą.
2. Įdėkite 2 × tiesioginį RT-qPCR buferį, RNazės neturintį ddH2O ir 20 × ROX etaloninį dažiklį (jei jis“s reikia) dėžutėje su ledu, kad šie natūraliai ištirptų ir švelniai išmaišytų.
B: Pasiruoškite of RT-qPCR sistema
Lentelė 1 : Pasiruoškite of RT-qPCR ssistema
| Komponentas | Apimtis | Galutinė koncentracija |
| 2 × tiesioginis RT-qPCR buferis | 10 μl | 1× |
| Tiesioginis fermentų mišinys | 1μL | |
| Pirminis gruntas (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Atvirkštinis gruntas (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Zondas (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Šablonas (RNR arba lizatas) | X μL | |
| 20×ROX etaloninis dažiklis | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Bendras tūris | 20μL |
C: Nustatyti į RT-qPCR reakcija programa
Lentelė 2 : RT-qPCR reaction programa nustatymą (dėl pavyzdys: du-žingsnis metodas)
| Žingsnis | Temperatūra | Laikas | Ciklai | Turinys | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Atvirkštinė transkripcija |
| 2 | 95 ℃ | 1 minutė | 1 | Išankstinė denatūracija | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denatūravimas | |
| 60 ℃ | 30 sek 2* | Atkaitinimas / pratęsimas | |||
Sandėliavimas ir galiojimo laikas
- Rinkinys turi būti laikomas -20± 5℃.Galiojimo laikas yra 12 mėnesių.
- Venkite kartotinių užšaldymo ir atšildymo ciklų (<5 ciklai).
