ForeDirect RT-qPCR rinkinys
Komplekto aprašymas:
◮Tiesioginiam RNR amplifikavimui realiuoju laiku iš tamponų rinkinių be RNR gryninimo procesų.Šis rinkinys užbaigia qRT-PGR ciklus per vieną valandą.Fermentų mišinys yra optimizuotas atvirkštinės transkriptazės, Hot-Start Taq DNR polimerazės, RNazės inhibitoriaus mišinys.Reakcijos buferyje yra visi reikalingi komponentai, įskaitant optimizuotus buferio komponentus, Mg2+, dUTP ir dNTP.
apibūdinimas
ForeDirect RT-qPCR rinkinys skirtas tiesioginiam RNR amplifikavimui realiuoju laiku iš tamponų rinkinių be RNR gryninimo procesų.Šis rinkinys užbaigia qRT-PGR ciklus per vieną valandą.Fermentų mišinys yra optimizuotas atvirkštinės transkriptazės, Hot-Start Taq DNR polimerazės, RNazės inhibitoriaus mišinys.Reakcijos buferyje yra visi reikalingi komponentai, įskaitant optimizuotus buferio komponentus, Mg2+, dUTP ir dNTP.
Specifikacijos
100T
Komplekto komponentai
| Nukleino rūgštis atpalaiduojanti medžiaga |
| RNR apsauga |
| 2 × RT-qPCR buferis |
| Fermentų mišinys (Taq&M-MLV) |
| Instrukcijos |
PGR taikymas
1. Kai PGR reakcijos mėgintuvėliai bus trumpai centrifuguoti, įdėkite juos į amplifikacijos instrumento mėginio baką.
2. Šiluminis protokolas
| Žingsnis | Temperatūra | Laikas | Ciklai | |
| 1 | Atvirkštinė transkripcija | 50 ℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Išankstinė denatūracija | 95 ℃ | 1 minutė | 1 |
| 3 | Denatūravimas | 95 ℃ | 10 sekundžių | 42 |
| 4 | Atkaitinimas / pratęsimas | 60 ℃ | 30 sekundžių | |
Pastaba:Fluorescencinis signalas buvo aptiktas iškart po kiekvieno ciklo pratęsimo.
3. Nustatę išsaugokite failą ir paleiskite reakcijos programą.
Veikimo žingsniai
Prieš ruošiant reagentą, visi rinkinyje esantys reagentai turi būti atšildyti kambario temperatūroje ir švelniai sumaišyti.
Reagento paruošimas
1. Paruoškite nukleino rūgščių atpalaidavimo mišinį
| Komponentas | Tūris mėginiui arba kontrolei |
| Nukleino rūgštis atpalaiduojanti medžiaga | 5 μl |
| RNR apsauga | 0,5 μl |
2. Paruoškite reakcijos mišinį
| Komponentas | Tūris mėginiui arba kontrolei |
| 2 × RT-qPCR buferis | 15 μl |
| Fermentų mišinys (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
| Gruntai ir zondai | 1 μl |
Sandėliavimas ir galiojimo laikas
- Rinkinys turi būti laikomas -20± 5℃.Galiojimo laikas yra 12 mėnesių.
- Venkite kartotinių užšaldymo ir atšildymo ciklų (<5 ciklai).
